Сайт для врачей о
клинической лабораторной диагностике
Фотометрические методы определения мочевины
Фотометрические методы определения мочевины основаны на реакции мочевины с различными веществами с образованием окрашенных соединений.
Среди фотометрических методов определения мочевины наиболее распространенными являются методы, основанные на реакции мочевины с диацетилмонооксимом (диацетилмонооксимная реакция, реакция Ферона), протекающей в два этапа.
На первом этапе диацетилмонооксим расщепляется до диацетила и гидроксиламина. На втором этапе диацетил в кислой среде вступает в реакцию конденсации с мочевиной с образованием окрашенного комплекса. Величину его поглощения регистрируют при 550 нм, либо по его способности к флюоресценции при 415 нм.
Изменению окраски и стабилизации комплекса способствует использование ряда соединений или удаление из реакции образующегося при гидролизе гидроксиламина. Для окисления гидроксиламина могут применяться следующие вещества: персульфат калия, мышьяковая кислота, хлорная кислота, катионы, феназон. Для интенсификации окраски и повышения ее стабильности применяются: тиосемикарбазид, фенилантраниловая кислота, глюкуронолактон, катионы, триптофан и нитриты.
Диацетилмонооксимную реакцию адаптировали для определения мочевины в моче и сыворотке крови. Основной недостаток этого метода — светочувствительность комплекса и быстрое снижение его окраски. Другим недостатком является токсичность реактивов для проведения данной реакции.
Однако, несмотря на имеющиеся недостатки, методы этой группы отличаются хорошей воспроизводимостью, высокой чувствительностью, большой специфичностью. В некоторых методах используется 20 — 50 мкл сыворотки, что позволяет применять их без депротеинизации сыворотки.
Диацетилмонооксимный метод определения мочевины утвержден в качестве унифицированного.
Литература:
- Слепышева В. В., Балябина М. Д., Козлов А. В. - Методы определения мочевины
- Справочник "Лабораторные методы исследования в клинике" под редакцией Меньшикова В. В. - Москва, "Медицина", 1987 г.
Новые статьи
2 января, 2013
Мочевая кислота. Неорганизованные осадки мочи.
Обычно мочевая кислота в моче микроскопически определяется в виде желтых, желто-зеленых и бурых или буро-фиолетовых кристаллов. Макроскопически же наличие большого количества мочевой кислоты определяется в виде буро-желтого или золотисто-желтого песка...
Раздел: Анализ мочи
15 мая, 2012
Неорганизованные осадки мочи
Неорганизованные осадки мочи состоят из различных солей, органических соединений и лекарственных веществ, осевших в моче в виде кристаллов или аморфных тел. Однако чаще неорганизованный осадок состоит преимущественно из солей...
Раздел: Анализ мочи
22 марта, 2012
Микроскопическое исследование осадка мочи
Микроскопическое исследование осадка мочи является неотъемлемой частью общеклинического исследования и часто служит основным методом диагностики заболеваний почек и мочевыводящих путей...
Раздел: Анализ мочи
5 июня, 2011
Глюкоза в моче. Клинико-диагностическое значение глюкозурии.
Появление глюкозы в моче называется глюкозурией. Глюкозурия обычно сопровождается полиурией при повышении осмолярности мочи, поскольку глюкоза - осмотически активное вещество. Между степенью глюкозурии и полиурии обычно наблюдается параллелизм...
Раздел: Анализ мочи
21 июля, 2010
Кетоновые тела в моче. Методы определения.
Принцип обнаружения кетоновых тел в моче. Нитропруссид натрия в щелочной среде реагирует с кетоновыми телами, образуя комплекс, окрашенный в розовато-сиреневый, сиреневый или фиолетовый цвет. Чувствительность проб около 50 мг/л кетоновых тел. Полуколичественную оценку результатов можно дать в интервале от 150 до 1500 мг/л...
Раздел: Анализ мочи