Сайт для врачей о
клинической лабораторной диагностике
Миелограмма
Фиксированные и окрашенные препараты костного мозга исследуют сначала под малым увеличением. При этом оценивают:
- клеточность костного мозга - соответствует норме или отличается от таковой (гиперклеточный, богатый, гипоклеточный, скудный костный мозг). В лабораториях, где не проводится подсчет миелокариоцитов в камере Горяева, иногда возникают трудности в оценке клеточности костного мозга. При этом удобно иметь под рукой окрашенные мазки периферической крови с уровнем лейкоцитов, соответствующим верхней и нижней границам нормы ядерных элементов костного мозга - для сравнения. Это может помочь дать ориентировочное заключение о клеточности костного мозга (например, около верхней или нижней границы нормы);
- мономорфность или полиморфность костного мозга;
- количество мегакариоцитов, если подсчет их в данной лаборатории проводится в мазке (см. подсчет мегакариоцитов);
- наличие гнезд раковых клеток (метастазы) или выявление гигантских клеток (Гоше, Нимана-Пика и др.);
- участки препарата, подходящие для подсчета миелограммы на большом увеличении (тонкая зона мазка с расположением эритроцитов отдельно друг от друга и достаточным количеством исследуемых клеток).
Затем препараты исследует с иммерсионным объективом. При этом проводят дифференцированный подсчет миелокариоцитов (морфологические характеристики ретикулярных клеток и морфологические характеристики клеток миелоцитарного ростка описаны в соответствующих статьях). Считают подряд все попадающиеся клетки в разных участках мазка (если мазков несколько - считают клетки в разных мазках) общим количеством не менее 500, а затем выводят процентное соотношение клеток.
В результат подсчета миелограммы должны входить следующие виды клеток:
- недифференцированные бласты;
- все клетки гранулоцитарного ростка (при этом считают отдельно все клетки нейтрофильного и эозинофильного рядов, а также суммарное количество клеток каждого ряда, базофилы обычно считаются общим числом);
- все клетки моноцитарного ростка;
- все клетки лимфоидного ростка;
- все клетки эритроидного ростка и их сумма (мегалобласты, в случае их присутствия, считают отдельно от нормобластов);
- ретикулярные клетки (все их считают одним числом).
Отдельно на бумаге подсчитывают количество митозов. Выражают их на 100 клеток в каждом ряду.
Костно-мозговые индексы.
Клеточный состав костного мозга подвержен значительным количественным и качественным колебаниям, поэтому для объективной оценки пунктата костного мозга помимо подсчета миелограммы необходимо определение соответствующих костно-мозговых индексов.
Лейко-эритробластическое отношение
Лейко-эритробластическое отношение (Л/Э) вычисляется как отношение суммы процентного содержания всех лейкоцитов (сюда относят и гранулоциты, и агранулоциты - моноциты, лимфоциты, плазматические клетки) к общему содержанию всех ядерных элементов эритроидного ряда - от пронормобласта до зрелых форм. У здоровых взрослых людей лейко-эритробластическое отношение равно 2,1 - 4,5.
Повышение лейко-эритробластического отношения при богатом костном мозге свидетельствует о гиперплазии клеток лейкопоэза (что характерно для лейкозов (ХМЛ, ХЛЛ), инфекций, интоксикаций и др. состояний), а при бедном костном мозге - о подавлении красного ростка (гипопластическая анемия).
Снижение лейко-эритробластического отношения при богатом костном мозге наблюдается при гемолитической анемии, начале железодефицитной анемии, постгеморрагической и мегалобластной анемиях, при бедном костном мозге - при агранулоцитозе.
Следует отметить, что при гипоплазии и аплазии костного мозга, когда снижено количество клеток и лейкопоэза, и эритропоэза, лейко-эритробластическое отношение может быть в пределах нормы.
Индекс созревания нейтрофилов
Индекс созревания нейтрофилов (ИСН) выражает отношение молодых нейтрофильных гранулоцитов к зрелым и вычисляется по формуле:
(промиелоциты + миелоциты + метамиелоциты) / (палочкоядерные нейтрофилы + сегментоядерные нейтрофилы).
В норме этот индекс равен 0,5 - 0,9.
Снижение индекса созревания нейтрофилов может быть обусловлено значительной примесью периферической крови.
Повышение индекса созревания нейтрофилов при богатом костном мозге может наблюдаться при ХМЛ, лекарственной интоксикации, при бедном костном мозге - встречается редко (при быстрой элиминации зрелых форм).
Индекс созревания эритрокариоцитов
Индекс созревания эритрокариоцитов (ИСЭ) - отношение количества гемоглобинсодержащих нормобластов (а в патологических случаях - мегалобластов) к количеству всех клеток эритроидного ростка:
(полихроматофильные + оксифильные нормобласты) / (эритробласты + пронормобласты + все нормобласты).
В норме ИСЭ равен 0,7 - 0,9.
Снижение индекса созревания эритрокариоцитов наблюдается при железодефицитной и свинцовой анемиях, талассемии, гемоглобинопатиях и др. состояниях (когда идет нарушение синтеза гемоглобина).
Результаты исследования костного мозга оформляются в виде бланка. В зависимости от требований, предъявляемых лаборатории клиницистами, от "местных" лабораторных условий форма бланка и последовательность его заполнения может значительно варьировать в разных лабораториях, но обычно бланк состоит из двух частей: цифровой и описательной. Результаты подсчета миелограммы составляют цифровую часть бланка. Здесь помимо результатов исследования должны быть приведены нормальные величины всех показателей.
Клеточный состав костного мозга
Клеточные элементы | Содержание, % | ||
---|---|---|---|
Средние значения | Пределы колебаний | ||
Ретикулярные клетки | 0,9 | 0,1 - 1,6 | |
Бласты | 0,6 | 0,1 - 1,1 | |
Миелобласты | 1,0 | 0,2 - 1,7 | |
Нейтрофильные | промиелоциты | 2,5 | 1,0 - 4,1 |
миелоциты | 9,6 | 6,9 - 12,2 | |
метамиелоциты | 11,5 | 8,0 - 14,9 | |
палочкоядерные | 18,2 | 12,8 - 23,7 | |
сегментоядерные | 18,6 | 13,1 - 24,1 | |
Все нейтрофильные элементы | 60,8 | 52,7 - 68,9 | |
Эозинофилы всех генераций | 3,2 | 0,5 - 5,8 | |
Базофилы всех генераций | 0,2 | 0,0 - 0,5 | |
Эритробласты | 0,6 | 0,2 - 1,1 | |
Пронормобласты | 0,6 | 0,1 - 1,2 | |
Нормобласты: | базофильные | 3,0 | 1,4 - 4,6 |
полихроматофильные | 12,9 | 8,9 - 16,9 | |
оксифильные | 3,2 | 0,8 - 5,6 | |
Все эритроидные элементы | 20,5 | 14,5 - 26,5 | |
Моноциты | 1,9 | 0,7 - 3,1 | |
Лимфоциты | 9,0 | 4,3 - 13,7 | |
Плазматические клетки | 0,9 | 0,1 - 1,8 | |
Количество миелокариоцитов (в тыс. в 1 мкл) |
118,4 | 41,6 - 195,2 | |
Лейко-эритробластическое отношение | 3,3 | 2,1 - 4,5 | |
Индекс созревания нейтрофилов | 0,7 | 0,5 - 0,9 | |
Индекс созревания эритрокариоцитов | 0,8 | 0,7 - 0,9 |
Под цифровой частью бланка следует описательная часть с выводами. Прежде чем сделать окончательное заключение о состоянии костного мозга, необходимо соотнести полученные данные с нормой и с результатами исследования периферической крови. В ряде случаев необходимо решить, не разведен ли костный мозг кровью, так как по препарату, сильно разведенному периферической кровью, невозможно достоверно оценить костно-мозговое кроветворение. В таких случаях рекомендуется повторная пункция.
Признаки разведения костного мозга периферической кровью:
- пунктат бедный;
- пунктат представлен преимущественно зрелыми клетками периферической крови, соотношение нейтрофилов и лимфоцитов приближается к периферической крови;
- в пунктате присутствуют единичные эритрокариоциты, а периферическая кровь анемию не показывает;
- лейко-эритробластическое отношение повышено, индекс созревания нейтрофилов снижен;
- единичные мегакариоциты в препарате или полное их отсутствие, а количество тромбоцитов в периферической крови в норме.
В описательной части обращают внимание на следующие моменты:
- клеточность костно-мозгового пунктата
- клеточный состав - мономорфный или полиморфный; если мономорфный, то какими клетками представлен в основном (бластными, лимфоидными, плазматическими и пр.) или отмечается тотальная метаплазия;
- тип кроветворения (нормобластический, мегалобластический, смешанный), если имеются мегалобластические элементы, указать в процентах;
- значение лейко-эритробластического индекса, в случае отклонения от нормы - пояснить, за счет каких элементов.
Затем необходимо охарактеризовать ростки кроветворения:
-
миелоидный росток:
- размеры ростка (а пределах нормы, ряд хорошо выражен, сужен, редуцирован, представлен единичными клетками, гиперплазирован, раздражен и т. д.);
- особенности созревания ( с нормальным созреванием, с задержкой созревания на молодых формах, с асинхронным созреванием ядра и цитоплазмы, с преобладанием зрелых форм нейтрофилов);
- наличие дегенеративных изменений (токсическая зернистость нейтрофилов, вакуолизация, гиперсегментация, цитолиз, кариорексис и др.)
- наличие конституциональных аномалий гранулоцитов;
- количество митозов на 100 клеток;
-
эритроидный росток:
- размеры ростка (в пределах нормы, ряд хорошо выражен, сужен, редуцирован, представлен единичными клетками, гиперплазирован, раздражен и т. д.);
- особенности созревания (с нормальным созреванием, с незначительной задержкой созревания, с умеренной задержкой созревания, с резкой задержкой созревания, с асинхронным созреванием ядра и цитоплазмы, с преобладанием оксифильных нормобластов);
- наличие патологических форм эритрокариоцитов (мегалобластов)
- наличие патологических форм эритроцитов (анизоцитоз, анизохромия, пойкилоцитоз, патологические включения в эритроцитах);
- количество митозов на 100 клеток;
-
мегакариоцитарный росток:
- размеры ростка (в пределах нормы (5 - 12 мегакариоцитов в 250 полях зрения), сужен, редуцирован, представлен единичными клетками, гиперплазирован, раздражен и т. д.);
- особенности созревания (с нормальным созреванием, с задержкой созревания (увеличение или преобладание базофильных форм), с асинхронным созреванием ядра и цитоплазмы, с преобладанием оксифильных форм);
- наличие дегенеративных изменений;
- наличие или отсутствие зернистости в цитоплазме;
- степень отшнуровки тромбоцитов (умеренная, отсутствует, сниженная, повышенная, чрезмерная);
- количество и характер свободно лежащих тромбоцитов (отсутствуют, единичные, небольшое количество, умеренное количество, значительное количество, расположены отдельными пластинками, группами или скоплениями);
- особенности морфологии тромбоцитов (увеличение количества юных, старых или дегенеративных форм, форм раздражения, наличие гигантских, агранулярных тромбоцитов, анизоцитоз тромбоцитов).
Если количество бластов в пунктате превышает норму, необходимо описать их - форма и размер клеток, характер цитоплазмы (количество, цвет, наличие зернистости или палочек Ауэра, вакуолей), ядро (размеры, форма, окраска, структура хроматина), ядрышки (наличие, количество, размер, форма, окраска). При проведении цитохимических исследований бластов, в бланке приводятся их результаты.
При повышении содержания плазматических клеток в мазках следует указать
- расположение (равномерно по препарату, группами или отдельными скоплениями),
- размеры клеток (преимущественно крупные, средние или мелкие, полиморфные);
- контуры цитоплазмы (фестончатые, ровные);
- окраску цитоплазмы (слабая, умеренная, резко базофильная);
- наличие включений или зернистости в цитоплазме (скудная, умеренная, обильная);
- расположение ядра (центральное, эксцентричное);
- структуру хроматина (мелкогранулированная или крупногранулированная, глыбчатая и т. п.);
- наличие многоядерных и пламенеющих клеток.
Описать нехарактерные для костного мозга клетки (в случае их присутствия):
- клетки Березовского-Штернберга;
- клетки Ланганса;
- клетки Гоше;
- клетки Нимана-Пика;
- клетки Ходжкина;
- клетки неидентифицируемого вида (клетки метастазов злокачественных опухолей).
При обнаружении в костно-мозговом пунктате неидентифицируемого вида клеток необходимо описать их по следующим признакам:
- размер и форма клеток, тип генерации - микро-, мезо-, макрогенерации, смешанные типы и др.;
- ядерно-цитоплазматическое соотношение (высокое, среднее, низкое или сдвиг его в пользу ядра или цитоплазмы);
- цитоплазма - объем (обильная, умеренная, скудная, почти не определяется - "голоядерная клетка"), четкость границ (четкие, нечеткие, имеются разрывы, прослеживается не на всем протяжении), контуры (ровные, фестончатые и т. п.), цвет (голубой, серо-голубой, розовый, розово-фиолетовый, базофильный), как окрашена (равномерно, неравномерно, стекловидная, наличие перинуклеарного просветления), наличие зернистости (обильная, скудная, покрывающая ядро, крупная, пылевидная, однокалиберная и т. п.), включений, вакуолей;
- ядро - количество (одно- или многоядерные клетки), расположение (в центре, эксцентрично, занимает почти всю клетку), размер (мелкие, средние, крупные, гигантские), форма (округлая, овальная, полигональная, вытянутая, бобовидная, булавовидная, расщепленная, в виде перекрученного жгута и др.), окрашиваемость (гипохромия, гиперхромия, анизохромия, равномерно окрашенное), наличие фигур деления;
- структура хроматина - тонкодисперсная, гомогенная, нежнопетлистая, мелко- или крупнозернистая, глыбчатая, конденсация хроматина по краю ядерной мембраны и т. д.;
- ядрышки - наличие (есть, нет), количество, форма (округлая, неправильная), размеры, цвет, четкость границ, выраженность перинуклеарного валика.
В конце описательной части, если позволяют данные, ставится предполагаемый лабораторный диагноз. Мазки костного мозга маркируют и хранят в архиве.
Литература:
- Л. В. Козловская, А. Ю. Николаев. Учебное пособие по клиническим лабораторным методам исследования. Москва, Медицина, 1985 г
- Руководство по клинической лабораторной диагностике. (Части 1 - 2) Под ред. проф. М. А. Базарновой, академика АМН СССР А. И. Воробьева. Киев, "Вища школа", 1991 г.
- Справочник по клиническим лабораторным методам исследования. Под ред. Е. А. Кост. Москва "Медицина" 1975 г.
- Руководство к практическим занятиям по клинической лабораторной диагностике. Под ред. проф. М. А. Базарновой, проф. В. Т. Морозовой. Киев, "Вища школа", 1988 г.
- Н. Б. Протопопова, Д. А. Грищенко, О. Ю. Изъюрова, Е. М. Федина - Алгоритм исследования препаратов костного мозга - журнал "Справочник заведующего КДЛ" №1, январь, 2006 г.
Новые статьи
2 января, 2013
Мочевая кислота. Неорганизованные осадки мочи.
Обычно мочевая кислота в моче микроскопически определяется в виде желтых, желто-зеленых и бурых или буро-фиолетовых кристаллов. Макроскопически же наличие большого количества мочевой кислоты определяется в виде буро-желтого или золотисто-желтого песка...
Раздел: Анализ мочи
15 мая, 2012
Неорганизованные осадки мочи
Неорганизованные осадки мочи состоят из различных солей, органических соединений и лекарственных веществ, осевших в моче в виде кристаллов или аморфных тел. Однако чаще неорганизованный осадок состоит преимущественно из солей...
Раздел: Анализ мочи
22 марта, 2012
Микроскопическое исследование осадка мочи
Микроскопическое исследование осадка мочи является неотъемлемой частью общеклинического исследования и часто служит основным методом диагностики заболеваний почек и мочевыводящих путей...
Раздел: Анализ мочи
5 июня, 2011
Глюкоза в моче. Клинико-диагностическое значение глюкозурии.
Появление глюкозы в моче называется глюкозурией. Глюкозурия обычно сопровождается полиурией при повышении осмолярности мочи, поскольку глюкоза - осмотически активное вещество. Между степенью глюкозурии и полиурии обычно наблюдается параллелизм...
Раздел: Анализ мочи
21 июля, 2010
Кетоновые тела в моче. Методы определения.
Принцип обнаружения кетоновых тел в моче. Нитропруссид натрия в щелочной среде реагирует с кетоновыми телами, образуя комплекс, окрашенный в розовато-сиреневый, сиреневый или фиолетовый цвет. Чувствительность проб около 50 мг/л кетоновых тел. Полуколичественную оценку результатов можно дать в интервале от 150 до 1500 мг/л...
Раздел: Анализ мочи